फ्लो साइटोमेट्री एक विशिष्ट तकनीक है जिसे वैज्ञानिक एक नमूने में कोशिकाओं के विभिन्न घटकों का विश्लेषण और मापन करने के लिए उपयोग करते हैं। यह तकनीक बहुत उपयोगी है, क्योंकि यह अनुसंधानकर्ताओं को नमूने से कोशिकाओं की संख्या और कोशिकाओं का आकार और आकृति निर्धारित करने में सहायता करती है। फ्लो साइटोमेट्री की एक और बात यह है कि यह निर्धारित करना है कि कोशिकाएँ जीवित हैं या नहीं। इसे पूरा करने के लिए, वैज्ञानिक कोशिकाओं को लेज़र किरण के माध्यम से गुज़ारते हैं। कोशिकाएँ लेज़र द्वारा अवशोषित लाल प्रकाश को प्रतिबिंबित करती हैं। प्रतिबिंबित प्रकाश को मापा जाता है और रिकॉर्ड किया जाता है। इस जानकारी के साथ, अनुसंधानकर्ताओं को अध्ययन में लिए गए कोशिका जनसंख्या और उनकी प्रकृति के बारे में बहुत सारी जानकारी प्राप्त करने का मौका मिलता है। इमेजिंग फ्लो साइटोमेट्री जैविक और चिकित्सा अनुप्रयोगों में एक लोकप्रिय विधि है। यह वैज्ञानिकों को सेल कैसे काम करती हैं और उनके जीवन के लिए क्या आवश्यकताएँ हैं, इसका अध्ययन करने में मदद करती है। यह प्रक्रिया रक्तबीमारी (अमूनिटी सिस्टम का अध्ययन), हीमेटोलॉजी (रक्त का अध्ययन) और खराब निशानों के नवीनतम अनुसंधान जैसे कई क्षेत्रों में विशेष रूप से महत्वपूर्ण है। फ़्लो साइटोमेट्री प्रयोग करते समय वैज्ञानिकों को ध्यान देने योग्य कुछ बातें ये हैं:
नमूने को ठीक से तैयार करना पहला कदम है। यह इसका अर्थ है कि सही तरल, जिसे बफ़र कहा जाता है, और सही रंग के रंगने वाले पदार्थों का चयन करना। दूसरा कदम डेटा अधिग्रहण है। यह वह हिस्सा है जहाँ नमूना फ्लो साइटोमेटर के माध्यम से चलता है फ्लो सेल फ्लो साइटोमेट्री , जहां वास्तविक मापन किए जाते हैं। अंतिम परन्तु कम नहीं, चौथा कदम डेटा विश्लेषण है। इस चरण के दौरान शोधकर्ताओं को उनके द्वारा संग्रहित डेटा से उपयोगी जानकारी मिलती है, जो उनके शोध में उन्हें सहायता प्रदान करती है। हालांकि, फ़्लो साइटोमेट्री प्रयोगों में समस्याएं आ सकती हैं, और यह बहुत जरूरी है कि वैज्ञानिकों को इन स्थितियों को ठीक करना सीखना चाहिए। फ़्लो साइटोमेट्री के दौरान हो सकने वाली सामान्य समस्याएं हैं - कोशिका गुच्छे, टूटे हुए उपकरण, और मिश्रित संकेत। कोशिका गुच्छे तब होते हैं जब कोशिकाएं एक साथ आ जाती हैं, जो सटीक मापन को प्रभावित कर सकते हैं। कोशिका गुच्छों को कम करने के लिए, वैज्ञानिक टेस्ट से पहले कोशिकाओं को अलग कर सकते हैं, जिसे कोशिका स्ट्रेनर कहा जाता है, ऐसे उपकरण का उपयोग करके।
यदि मशीन में कुछ समस्याएं होती हैं, उदाहरण के लिए, यह सही ढंग से काम नहीं करती है, तो एक विशेषज्ञ से संपर्क करना सलाहित है, जो इसकी मरम्मत में मदद करेगा। एक और समस्या जो उठ सकती है, वह सिग्नल परेशानी है। यह अर्थ है कि बाहरी सिग्नल परिणामों को साफ़ कर सकते हैं। इसे कम करने के लिए, एक को मल्टीकोलर फ्लो साइटोमेट्री अपने प्रयोग के दौरान कम पृष्ठभूमि शोर के साथ सावधानीपूर्वक सेट करना चाहिए, खासकर ध्वनि-आधारित डेटा के साथ।
दो महत्वपूर्ण रंगवटों के उदाहरण जो उपयोग किए जाते हैं सिंगल सेल फ्लो साइटोमेट्री (HC) में होएच्सट 33342 और प्रोपिडियम आयोडाइड (PI) हैं। होएच्सट 33342 एक चमकीला रंगवट है जिसे वैज्ञानिक जीवित कोशिकाओं को चिह्नित करने के लिए उपयोग करते हैं। यह यह भी जांचने में मदद कर सकता है कि कोशिकाएं स्वस्थ और जीवित हैं या नहीं। इसके विपरीत, PI अक्षम कोशिकाओं के लिए एक चिह्न है, क्योंकि यह नुकसान पहुंची DNA को चिह्नित करता है। जब PI DNA से जुड़ता है, तो यह मृत कोशिकाओं को लाल चमकता होने का कारण बनाता है, जिससे वैज्ञानिक उन्हें आसानी से पहचान सकते हैं।
हॉएचस्ट 33342 वैज्ञानिकों के लिए भी उपयोगी है, क्योंकि इसे तब उपयोग किया जा सकता है जब उन्हें प्रवाह साइटोमेट्री परीक्षण के दौरान यह जाँचने की आवश्यकता होती है कि कोशिकाएँ जीवित हैं या नहीं। इस तरह, शोधकर्ताओं कोशिकाओं को रंगना होता है माइक्रोफ्लुइडिक्स प्रवाह साइटोमेट्री और इसे अन्य चमकीले रंगों के साथ मिलाया जाता है ताकि कोशिका की जीविता मापी जा सके, यानी मेरा मतलब है कि कोशिकाएँ जीवित हैं या मृत। यह तकनीक वैज्ञानिकों को यह भी बता सकती है कि कोशिकाएँ कैसे बढ़ रही थीं और क्या वे एपोप्टोसिस नामक प्रक्रिया के दौरान थीं, जब कोई कोशिका सुरक्षित और प्राकृतिक ढंग से मर जाती है।
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